高效液相色譜儀的等強度洗脫和梯度洗脫系統(tǒng)高效液相色譜儀是一個強有力的分離分析工具。但是,作為洗脫用流動相并不單純是一種溶劑,而由兩種或兩種以上的溶劑(或緩沖液)以不同百分比組合而成。例如:甲醇-水、乙腈-水、乙腈一磷酸緩沖液和己烷-乙酸乙酯等等,以不同百分比混合組成流動相。如果在洗脫過程中溶劑的混合組成不變,就稱作等強度洗脫,即溶劑強度保持不變。如果在洗脫過程中溶劑的混合組成隨時間變化的,稱作梯度洗脫。依照溶劑強度隨時間變化的梯度洗脫技術(shù)在液相色譜中是十分有用的。不少難分離的物質(zhì)對以及極性相差較大的混合物需要依靠梯度洗脫得到分離。下圖示出三元溶劑梯度洗脫系統(tǒng)。
單臺高壓泵通過比例閥與三個溶劑貯器相連,按照預(yù)先設(shè)計的梯度程序由梯度程序儀按不同時間發(fā)出指令,通過閥驅(qū)動器控制三個比例閥按不同的時間間隔開閉。換句話說,高壓泵從三個溶劑貯器的溶劑吸入量是隨比例閥開閉時間長短而不同,集中到混合器后構(gòu)成了混合溶劑強度隨時間變化的曲線,即梯度洗脫曲線!鱰1,△t2和△t3分別代表三個比例閥的啟開時間間隔,如果泵的流速不變,則某一貯器內(nèi)溶劑抽提的百分數(shù)如下式所示:
雙泵二元梯度洗脫系統(tǒng)(下圖)是通過高壓泵改變驅(qū)動速度,使得兩種溶劑的吸入量隨時間而變化,經(jīng)過混合器,其混合溶劑強度隨時間而變化。此時,某一貯器內(nèi)溶劑抽提的百分數(shù)可由下式表示。
式中F1、F2為兩個高壓泵各自的流量。