分析型等電聚焦電泳儀

分析型等電聚焦電泳儀
分析型等電聚焦電泳儀，有若干公司生產(chǎn)�，F(xiàn)以瑞典pharmacia LKB 公司生產(chǎn)的multiphor Ⅱ型水平電泳儀為例介紹。Multiphor Ⅱ型水平電泳儀是一種多用途水平電泳儀，不僅可做等電聚焦電泳，也可做聚丙烯酰胺凝膠電泳和雙向電泳，配以一定的附件，還可做蛋白轉(zhuǎn)印等。Multiphor Ⅱ型水平電泳儀的基本構(gòu)造見(jiàn)下圖。

　　電泳儀的下部是一個(gè)裝緩沖溶液的槽，兩側(cè)分別可裝一升緩沖溶液。槽的支架上裝有一塊210×270mm 的冷卻板，內(nèi)有循環(huán)冷卻水管路。冷卻板上方裝有兩個(gè)可移動(dòng)電極桿，其位置隨電泳膠的大小可調(diào)。電泳儀的最上部是一個(gè)有機(jī)玻璃蓋，其設(shè)計(jì)保證與下部電泳槽相匹配，以防止電泳過(guò)程中的水分蒸發(fā)，蓋上配有接通電泳插頭，蓋的開(kāi)關(guān)與電路的接通和斷開(kāi)同步，以保證安全。
　　等電聚焦電泳儀的制膠模具由兩塊玻璃（其中一塊兩側(cè)帶有0.5mm 厚的邊）以及兩個(gè)夾子組成（下圖）。玻璃板的大小可根據(jù)電泳裝置而定。制膠時(shí)，在玻璃板上放少許水，用滾筒將一塊塑料支持薄膜或一張玻璃紙（預(yù)先在蒸餾水中浸泡）壓在不帶邊的玻璃板上。排除氣泡，使膜緊貼玻璃。蓋上帶有0.5mm 邊的玻璃板。兩端各留有約1厘米空隙，在玻璃板的長(zhǎng)側(cè)分別用夾子夾緊，用帶有橡皮管的注射器吸取預(yù)先配置并經(jīng)脫氣處理的凝膠溶液，均勻緩慢地注入模具的玻璃板之間，室溫放置約1h 后聚合完成，打開(kāi)模具，測(cè)高儀| 測(cè)距儀| 金屬探測(cè)器| 試驗(yàn)機(jī)| 扭力計(jì)| 流速儀| 粗糙度儀| 流量計(jì)| 平衡儀| 小心從玻璃板上剝離帶有塑料支持膜（或玻璃紙）的整張膠板備用。

　　在等電聚集時(shí)，由于電場(chǎng)的高壓會(huì)產(chǎn)生大量的熱而燒壞膠板，所以等電聚焦通常在4～10 ℃ 進(jìn)行，將制好的膠板放在鋪有塑料模板的冷卻板上。其間涂以液體石蠟或煤油以免進(jìn)入氣泡。用合適的電極溶液潤(rùn)濕電極條，并放置于凝膠上，加加樣濾紙，滑動(dòng)電極，使電極對(duì)準(zhǔn)電極條的中心，陽(yáng)極和陰極分別與電泳槽的正色極相連接，蓋上安全蓋，設(shè)定電壓、電流和功率，接通電源，電泳0.5h 后去掉加樣濾紙。若系容易變性或失活的樣品，先進(jìn)行預(yù)電泳15～30min 再加樣。
　　等電聚焦電泳所用電源通常為2000V 以上的恒壓、恒流、恒功率的三恒電源，分離區(qū)帶的定性定量方法同前述。