磁式細(xì)胞分選器簡(jiǎn)介

磁式細(xì)胞分選器簡(jiǎn)介
FCM雖然是分離復(fù)雜細(xì)胞群中特定細(xì)胞的有效方法，但也有細(xì)胞處理量小，含量低于10-4的痕量細(xì)胞不能分離，并且費(fèi)用較高等不足之處。目前市場(chǎng)上出現(xiàn)T 一種稱為磁式細(xì)胞分選器（magnetic activated cell sorting , MACS）的裝置，可作為細(xì)胞分析的預(yù)富集手段或FCM替代產(chǎn)品，價(jià)格便宜，使用方便，適宜于小型實(shí)驗(yàn)室配置使用。下圖分別是MACS的外形和分選工作原理。

　　MACS的分離效果已經(jīng)得到了免疫熒光、PCR、FISH及FCM的確認(rèn)，其原理是通過(guò)抗體對(duì)細(xì)胞膜表面抗原的特異性識(shí)別，將偶聯(lián)在抗體上的磁珠標(biāo)記在細(xì)胞上，再在外在磁場(chǎng)作用下以正選或負(fù)選方式選擇性地分離細(xì)胞。其分離策略可以敘述如下。  滴定儀| 密度計(jì)| 熱流計(jì)| 濃度計(jì)| 折射儀| 采樣儀|
　　1 ．磁珠標(biāo)記
　　將帶有磁珠的抗體快速和目的細(xì)胞的特殊表面抗原結(jié)合上去。
　　2 ．過(guò)柱分離
　　將處理過(guò)的細(xì)胞樣品流經(jīng)MACS分離柱，未經(jīng)標(biāo)記的細(xì)胞流出分離柱（負(fù)選），而標(biāo)記上磁珠的目的細(xì)胞則被外加磁場(chǎng)吸附在柱內(nèi)。
　　3 ．洗脫細(xì)胞
　　撤去外加磁場(chǎng)洗脫收集柱內(nèi)的細(xì)胞，即為正選的目的細(xì)胞。
　　此法的的特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)是適應(yīng)細(xì)胞種類廣，既可用于收集高含量的細(xì)胞也可用于富集痕量細(xì)胞（如抗原特異的B細(xì)胞、母親血液中的胎兒細(xì)胞、外周血中的造血干細(xì)胞和血液中的腫瘤細(xì)胞等），分離純度可高達(dá)95%～99%，細(xì)胞處理量可高達(dá)109。而最大優(yōu)點(diǎn)是磁珠不會(huì)影響細(xì)胞活力。其原因是MACS磁珠直徑僅50nm，相當(dāng)于一個(gè)病毒粒子大小，只有真核細(xì)胞的百萬(wàn)分之一。更為重要的是，MACS磁珠能形成穩(wěn)定的膠體溶液，在磁場(chǎng)中既不沉淀，也不聚合，而且作為磁珠成分的鐵氧化物和多糖能被細(xì)胞所降解，使細(xì)胞保持生理活性。細(xì)胞分離后磁珠一也無(wú)需去除。
　　細(xì)胞分選可以是正選、負(fù)選或正負(fù)選結(jié)合。正選就是讓目的細(xì)胞帶上磁珠，直接分離而得，此法快速也相對(duì)省錢；負(fù)選就是讓非目的細(xì)胞帶上標(biāo)記，收集未標(biāo)記細(xì)胞。負(fù)選一般只在無(wú)適當(dāng)抗體或抗體會(huì)影響細(xì)胞時(shí)才采用。正負(fù)選結(jié)合方法適用于分離細(xì)胞數(shù)極少或含有與其他非目的細(xì)胞相同表面抗原的細(xì)胞。