紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的常見(jiàn)故障和使用經(jīng)驗(yàn)

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的常見(jiàn)故障和使用經(jīng)驗(yàn)
一．光源部分：
（1）故障：鎢燈不亮；
原因：鎢燈燈絲燒斷（此種原因幾率最高）；
檢查：鎢燈兩端有工作電壓，但燈不亮；取下鎢燈用萬(wàn)用表電阻檔檢測(cè)。
處置：更換新鎢燈； 

    （2）故障：鎢燈不亮；
原因：沒(méi)有點(diǎn)燈電壓；
檢查：保險(xiǎn)絲被熔斷；
處置：更換保險(xiǎn)絲，（如更換后再次燒斷則要檢查供電電路）；

    （3）故障：氘燈不亮；
原因：氘燈壽命到期（此種原因幾率最高）；
檢查：燈絲電壓、陽(yáng)極電壓均有，燈絲也可能未斷（可看到燈絲發(fā)紅）；
處置：更換氘燈；

    （4）故障：氘燈不亮；
原因：氘燈起輝電路故障；
檢查：氘燈在起輝的過(guò)程中，一般是燈絲先要預(yù)熱數(shù)秒鐘，然后燈的陽(yáng)極與陰極間才可起輝放電，假如燈在起輝的開(kāi)始瞬間燈內(nèi)閃動(dòng)一下或連續(xù)閃動(dòng)，并且更換新的氘燈后依然如此，有可能是起輝電路有故障，燈電流調(diào)整用的大功率晶體管損壞的幾率最大。
處置：需要專(zhuān)業(yè)人士修理；

    二．信號(hào)部分：
（1）故障：沒(méi)有任何檢測(cè)信號(hào)輸出；
原因：沒(méi)有任何光束照射到樣品室內(nèi)；
檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為530nm，狹縫盡量開(kāi)到最寬檔位，在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處，觀(guān)察白紙上有無(wú)綠光斑影像；
處置：檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位？雙光束儀器的切光電機(jī)是否轉(zhuǎn)動(dòng)了（耳朵可以聞聲電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)的聲音）？

    （2）故障：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，全波長(zhǎng)范圍內(nèi)基線(xiàn)噪聲大；
原因：光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品；
檢查：觀(guān)察光源是否照射到進(jìn)射狹縫的中心？石英窗上有無(wú)污染物？
處置：重新調(diào)整光源鏡的位置，用乙醇清洗石英窗；

    （3）故障：樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下，僅僅是紫外區(qū)的基線(xiàn)噪聲大；
原因：氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物；
檢查：可見(jiàn)區(qū)的基線(xiàn)較為平坦，斷電后打開(kāi)儀器的單色器及上蓋，肉眼可以觀(guān)察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面；假如光學(xué)系統(tǒng)正常，最大的可能是氘燈老化，可以通過(guò)能量檢查或更換新燈方法加以判定；
處置：更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片（留意：此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗(yàn)者來(lái)實(shí)施）；

    （4）故障：樣品室放進(jìn)空缺后做基線(xiàn)記憶，噪聲較大，紫外區(qū)尤甚；
原因：比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空缺樣品對(duì)紫外光譜的吸收太強(qiáng)烈，使放大器超出了校正范圍；
檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為250nm，先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零，然后將空比色皿插進(jìn)樣品道一側(cè)，此時(shí)吸光值應(yīng)小于0.07Abs；假如大于此值，有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿；同樣方法也可判定空缺溶液的吸光值大��；
處置：清洗比色皿，更換空缺溶液；

    （5）故障：吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值（最常見(jiàn)）；
原因：沒(méi)做空缺記憶、樣品的吸光值小于空缺參比液；
檢查：將參比液與樣品液調(diào)換位置便知；
處置：做空缺記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液；

    （6）故障：樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良；
原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致；在簡(jiǎn)易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上；
檢查：更換一種穩(wěn)定的試樣判定；
處置：采取正確的試樣配置手段；修理推拉式樣品架的定位碰珠；

    （7）故障：做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時(shí)，基線(xiàn)或信號(hào)有一個(gè)大的負(fù)脈沖；
原因：掃描速度設(shè)置得過(guò)快，信號(hào)在讀取時(shí)，誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號(hào)讀取了；
檢查：改變掃描速度； 

    （8）故障：做基線(xiàn)掃描或樣品掃描時(shí)，基線(xiàn)或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿(mǎn)屏大噪聲；
原因：濾光片飼服電機(jī)“失步”，造成檔位錯(cuò)位，國(guó)產(chǎn)電機(jī)尤甚；
檢查：重新開(kāi)機(jī)有可能回復(fù)，或打開(kāi)單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來(lái)檢查（留意：打開(kāi)單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激）；
處置：更換飼服電機(jī)；

    （9）故障：樣品出峰位置不對(duì)；
原因：波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移；
檢查：通過(guò)氘燈的656.1nm的特征譜線(xiàn)來(lái)判定波長(zhǎng)是否正確；
處置：對(duì)于高檔儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單，使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可；而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器，這種調(diào)整則需要專(zhuān)業(yè)職員來(lái)進(jìn)行了；

    （10）故障：信號(hào)的分辨率不夠，具體表現(xiàn)是：本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無(wú)法觀(guān)察到；
原因：狹縫設(shè)置過(guò)窄而掃描速度過(guò)快，造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上，從而失往應(yīng)測(cè)到的信號(hào)；按常理，一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度；或者狹縫設(shè)置得過(guò)寬，使儀器的分辨率下降，將小峰融合在大峰里了。
檢查：放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄；
處置：將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)最優(yōu)化的條件；

    （11）故障：當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是丈量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器；
原因：開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良；
檢查：用手加重氣力按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化；
處置：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可；

    （12）故障：儀器零點(diǎn)飄忽不定，主要反映在簡(jiǎn)易儀器上；
原因：在簡(jiǎn)易儀器中，零點(diǎn)往往是通過(guò)電位器來(lái)調(diào)整，這種電位器一般是炭膜電阻制作的，使用久了往往造成接觸不良；
處置：更換電位器； 測(cè)厚儀| 測(cè)速儀| 轉(zhuǎn)速表| 壓力表| 壓力計(jì)| 真空表| 硬度計(jì)| 探傷儀| 電子稱(chēng)| 熱像儀| 頻閃儀|

使用經(jīng)驗(yàn)
 1、幾乎所有的光譜分析儀器(如紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、原子吸收分光光度計(jì)、一些儀器光度檢測(cè)器)都是依據(jù)的朗伯-比耳定律。  
2、很多藥品要求相對(duì)誤差在1%以?xún)?nèi)。 
3、若石英比色皿QC的配對(duì)誤差為0.1%T，則給使用者帶來(lái)的分析誤差(△A/A)為0.5%。若QC的配對(duì)誤差為0.5%，則分析誤差為3%。 
4、檢驗(yàn)石英比色皿QC的配對(duì)誤差時(shí)，QC中應(yīng)裝滿(mǎn)蒸餾水或溶劑。
5、用超聲波清洗比色皿時(shí)，一般用20W的清洗玻璃儀器的超聲波清洗30分鐘，就能解決題目，但盡不能用大功率超聲波來(lái)清洗比色皿，會(huì)損壞比色皿，特別是對(duì)那些用黏結(jié)方法制作的比色皿。 
6、分析測(cè)試時(shí)，注進(jìn)比色皿的溶液不要太滿(mǎn)，一般到比色皿高度的2/3即可。
7、一般的光電檢測(cè)器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應(yīng)，應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間照射、預(yù)熱時(shí)，打開(kāi)樣品室蓋，防止光電檢測(cè)器受光疲憊。 
 8、A.owen在1988年指出：“吸光度丈量的正確度，取決于儀器的SBW與試樣的自然帶寬NBW的比率。SBW/NBW≤0.1時(shí),吸光度正確度可高達(dá)99.5%。NBW≥20nm時(shí)，2nm的SBW對(duì)于吸光度的正確度測(cè)試是足夠的，可滿(mǎn)足大約99%的日常應(yīng)用�！�
9、我國(guó)藥典規(guī)定，用于藥檢的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的SBW一定要求≤2nm。
10、光譜帶寬以nm計(jì)，狹縫寬度以mm計(jì)。
11、波長(zhǎng)正確度在某種程度上，決定光度正確度。
12、噪聲限制紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)樣品分析濃度的下限，并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測(cè)試樣品濃度的上限。
13、雜散光對(duì)參比光束和樣品光束的影響是相同的。
14、在要求較高的分析測(cè)試工作中，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的雜散光應(yīng)優(yōu)于0.05%，這樣可保證儀器有較寬的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍。
15、W.slavin以為，雜散光通常在紫外區(qū)。實(shí)際測(cè)試時(shí)，應(yīng)檢測(cè)整個(gè)光譜區(qū)的兩個(gè)端點(diǎn)的雜散光。
16、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來(lái)講，掃描速度快的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的噪聲也大。
17、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的基線(xiàn)平直度是指每個(gè)波長(zhǎng)上的光速噪聲。測(cè)基線(xiàn)平直度時(shí)，掃描速度用慢速。
18、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。
19、在常規(guī)分析中，對(duì)大多數(shù)試樣濃度大多取10～100ug/ml，相當(dāng)0.3～0.7Abs左右最佳。在試樣量答應(yīng)時(shí)，試樣應(yīng)選擇靠近最佳吸光度值(0.434Abs)的濃度。
20、為了得到更好的光度正確度，在分析過(guò)程中，特別要留意選擇試樣的最大吸收峰處的波長(zhǎng)作為測(cè)試波長(zhǎng)。
21、選擇光譜帶寬的原則是，在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)試吸光度隨光譜帶寬的變換，以獲得最大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。
22、判定被測(cè)試樣是否有光解現(xiàn)象，首先要看測(cè)試數(shù)據(jù)的變化規(guī)律，對(duì)同一個(gè)試樣多次丈量，看其吸光度值是否都是向同一個(gè)方向變化，假如是，就可能有光解現(xiàn)象。