保健食品中B族維生素及咖啡因含量的測定方法

保健食品中B族維生素及咖啡因含量的測定方法
1、試劑 
　　1.1甲醇分析純。
　　1.2磷酸分析純。
　　1.3乙腈色譜純。
　　1.4硫酸月桂脂鈉（SodiumDodecylsulfate）、1－癸烷磺酸鈉（Sodium1－Decanesulfonate）液相色譜用。 分析儀| 溶氧計(jì)| 電導(dǎo)度計(jì)| PH計(jì)| 酸堿計(jì)| 糖度計(jì)| 鹽度計(jì)| 酸堿度計(jì)| 電導(dǎo)計(jì)| 水分測定儀| 濁度計(jì)|
　　1.5標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確稱重已測定水分的鹽酸硫胺素（VB1）和鹽酸吡哆醇（VB6）標(biāo)準(zhǔn)品各0.0500g，溶于水中，準(zhǔn)確配成50ml溶液。此溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液A。準(zhǔn)確稱量已測定水分的煙酰胺和煙酸標(biāo)準(zhǔn)品0.0400g，溶于水中，準(zhǔn)確配成20ml溶液。此溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液B。準(zhǔn)確稱量經(jīng)80℃干燥4h的咖啡因0.0500g，準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)溶液A5ml標(biāo)準(zhǔn)溶液B10ml，再加入甲醇：水：磷酸＝100：400：0.5混合溶液，并稀釋至20ml作為標(biāo)準(zhǔn)溶液，此溶液每ml含VB15μg，VB65μg，煙酸20μg，煙酰胺20μg，咖啡因50μg。
　　2、儀器設(shè)備
　　2.1高效液相色譜儀：附紫外檢測器。
　　2.2超聲波清洗器。
　　2.3離心機(jī)。
　　3、分析步驟
　　3.1準(zhǔn)確稱取一定量片劑粉末或膠囊內(nèi)容物于試管中，加入甲醇：水：磷酸＝100：400：0.5混合溶液，使?jié)舛葹槊亢辽�中大約含VB1、、VB60.25mg，煙酸、煙酰胺1mg。超聲提取5min后以3000rpm/min離心5min，上清液經(jīng)0.45μm濾膜過濾后待進(jìn)樣。
　　3.2液體樣品直接以甲醇：水：磷酸＝100：400：0.5混合溶液稀釋，充分混勻后經(jīng)0.45μm濾膜過濾后待進(jìn)樣。
　　3.3色譜條件
　　3.3.1色譜柱：TSKC184.6×150ｍｍ
　　3.3.2柱溫：室溫
　　3.3.3檢測波長：VB１260ｎｍ
　　3.3.4靈敏度：0.02AUFS
　　3.3.5流動(dòng)相：VB１：硫酸月桂脂鈉溶液（5□530）：乙腈：磷酸＝530：470：1
　　咖啡因、煙酸、煙酰胺、VB6：1-癸烷磺酸鈉溶液（1.22□850）：乙腈：磷酸＝850：150：1
　　3.3.6流速：1ml/min
　　3.3.7進(jìn)樣量：10μL
　　3.3.8色譜分析：量取10μL標(biāo)準(zhǔn)溶液及試樣凈化液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以試樣峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。