生物芯片技術(shù)流程

生物芯片技術(shù)流程

生物芯片技術(shù)不僅能夠提供極為豐富的信息，而且使用芯片的流程也不復雜。主要包括四個基本要點：芯片方陣的構(gòu)建、樣品的制備、生物分子反應和信號的檢測及分析。首先是準備好芯片和待檢測樣品。采用光導原位合成或微量點樣等方面，將大量生物大分子如核酸片段、多肽分子甚至組織切片、細胞等生物樣品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝膠或尼龍膜等載體）的表面，組成密集二維分子排列，然后與已標記的待測生物樣品中靶分子雜交。如果是檢測表達譜，就需要從待檢測樣品mRNA或者total RNA中制備cDNA探針，與芯征雜交；如果是SNP檢測，則需要從待檢測樣品GenomicDNA中通過PCR制備探針。芯片雜交屬于固-液相雜交，與常規(guī)的Southern雜交相似，經(jīng)過高嚴謹度的洗滌后進行結(jié)果檢測。制作者需要根據(jù)探針標記分子的種類和芯片的規(guī)格來選擇檢測方法。對于Macroarrayg 一類的膠膜芯片，可選擇同位素標記、化學發(fā)光法標記，檢測時需要X光片壓片曝光-顯影-掃描記錄，再選用相應的軟件進行數(shù)據(jù)分析。條件較好的實驗室也可以選用磷屏成像系統(tǒng)代替X光片，直接成像并進行定量分析。通過比較芯片上相同位置上的基因（即同一基因）在不同樣品的雜交信號，就可以得到這一基因在不同樣品中的表達信息。對于Microarray一類的玻離片基芯片，通常使用的標記方法是熒光標記，通過特殊的芯片掃描儀掃描和相應的軟件進行數(shù)據(jù)分析。
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